超微量分光光度計適用于更寬濃度范圍的樣品檢測,操作簡便,不僅可用于測量DNA,RNA純度、濃度,測量蛋白質濃度,也可用于一般物質分析中的吸光度檢測。
原理:根據朗伯-比爾(Lamber-Beer)定律,A=K·C·L 式中,A為吸光度;K為吸(消)光系數;C為溶液的濃度;L為液層厚度。此公式說明:在入射光一定時,溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數學表達式,又叫朗伯-比爾定律。
與傳統分光光度計相比,超微量分光光度計具備哪些優勢?
(1)所需樣品體積小,僅需0.5—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染;
(3)一般具有多個光程(電機控制自動選擇),而傳統分光光度計的光程為10 mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規分光光度計的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預熱,可隨時檢測,檢測時間短;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據實驗室空間體積比傳統分光光度計小很多。